细胞复苏新方案，IKA MATRIX 恒温混匀仪

细胞生物学实验的日常，都是跟细胞培养、冻存和复苏这些基本的操作密不可分的。在细胞冻存和复苏领域一直奉行着一条黄金法则，那就是“慢冻快融”！ 实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。

 慢冻

细胞是很脆弱的，尤其是哺乳动物细胞，只有一层薄薄的细胞膜，没有坚固的细胞壁保护，在进入冻存状态前，缓慢的降温过程有助于保存细胞的活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜（DMSO）作保护剂，这两种物质能提高细胞膜对水的通透性，加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外，减少细胞内冰晶的形成，从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。标准的冻存程序为降温速率-1～-2℃/ min；当温度达-25℃以下时，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃时，则可迅速浸入液氮中。

快融

 细胞复苏，是指将冻存在液氮或者-70℃冰箱中的细胞解冻之后重新培养，细胞恢复生长的过程。复苏细胞应采用快速融化的方法，这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内融化，避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成的损伤。

 最常见的复苏工具

水作为一种使用广泛的导热介质，具有良好的导热性，可以保证快速加热，同时也可防止冻存管内部的局部过热。水浴是细胞培养实验室的标准配置之一，在进行细胞复苏实验时，无需额外的辅助设备或试剂。然，水浴经常是作为实验室共享的设备，若无专人值守，则水浴槽内的水不会定期进行更换，就会携带污染，会间接导致复苏细胞的污染风险。复苏过程，常伴随着对冻存管的晃动（晃动可以防止管内样品产生温度差异），管盖处也有渗入水的可能。